Piruvato ou Lactato ?
Ao SAC BioTécnica é recorrente o questionamento: A metodologia do kit de Desidrogenase Lática (LDH) da Biotécnica é Piruvato ou Lactato ?
Em uma primeira análise, a questão parece ser bastante simples. No entanto, qual é realmente o questionamento feito pelo cliente ?
Interpretação 1 – O kit produz na reação o Piruvato ou o Lactato ?
Interpretação 2 – O kit possui em seu reagente o substrato Piruvato ou o substrato Lactato ?
Conforme a forma de se perguntar, o questionamento costuma confundir alguns usuários, já que a Interpretação 1 é o inverso da Interpretação 2. Logo, um mal entendimento da metodologia utilizada pode, numa fase pós-analítica de Controle de Qualidade Laboratorial, levar até à liberação de um resultado não adequado. Portanto, é importantíssimo conhecer exatamente qual a metodologia que se está sendo usada.
Hoje, as metodologias mais comuns para a determinação da LDH são as reações cinéticas UV crescente e UV decrescente. O desenvolvimento destas metodologias ocorreu devido a uma peculiaridade da enzima LDH humana (L-lactate : NAD oxidoreductase; EC 1.1.1.27), que dependendo do pH transforma o Piruvato em Lactato (pH 7,4 a 7,8), adotada pela Sociedade Alemã de Química Clínica – DGKC (1) ou o Lactato em Piruvato (pH 8,8 a 9,8) adotada pela Federação Internacional de Química Clínica (IFCC), mostrados no esquema da reação abaixo:
Desta forma, os reagentes utilizados para cada metodologia são diferentes, no que diz respeito a sistemas tampão, substratos e etc., configurando kits comerciais também diferentes. Além disto, os intervalos de referência (a 37oC) são também discrepantes, sendo para a metodologia P → L de 225 a 450 U/L e para a metodologia L → P de 30 a 200 U/L. A figura abaixo mostra as diferenças nos gráficos de reação para as duas metodologias:
Rotineiramente, costuma-se denominar LDH-L para as metodologias com o substrato Lactato no reagente (portanto com reação Lactato → Piruvato) e LDH-P para metodologias com substrato Piruvato no reagente (portanto com reação Piruvato → Lactato). Assim, ao estabelecer uma nova metodologia de LDH no laboratório, é fundamental a pré-definição e estudo de qual metodologia está sendo usada para então poder liberar resultados e participar de programas de proficiência e acreditação laboratorial.
Aos participantes do PNCQ (Programa Nacional de Controle de Quallidade) da SBAC, é importante verificar que a sua denominação para a LDH-P é LDH – Metodologia UV LACTATO (P → L) (3). A Biotécnica oferece aos seus clientes a metodologia LDH-P da DGKC, que apresenta desempenho otimizado dentro dos padrões internacionais de excelência laboratorial.
1 - Deutsche Gesellschaft für Klinische Chemie: Empfehlungen der Deutschen Gesellschaft für Klinische Chemie (DGKC). J Clin Chem Clin Biochem 1972;10:182–193.
2 - Bais R, Philcox M. Approved recommendation on IFCC methods for the measurement of catalytic concentration of enzymes. Part 8. IFCC method for lactate dehydrogenase. Eur J Clin Chem Clin Biochem 1994;32:639–55.
3 – http://www.pncq.org.br/
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